မော်လီကျူး ထောက်လှမ်းခြင်း နည်းလမ်းများသည် နမူနာများတွင် တွေ့ရှိသော ခြေရာခံ ပမာဏကို ချဲ့ထွင်ခြင်းဖြင့် နျူကလိကလစ် အက်ဆစ် အမြောက်အမြား ထုတ်လုပ်နိုင်စွမ်း ရှိသည်။၎င်းသည် ထိလွယ်ရှလွယ် ထောက်လှမ်းခြင်းအတွက် အကျိုးရှိသော်လည်း ဓာတ်ခွဲခန်းပတ်ဝန်းကျင်တွင် ချဲ့ထွင်ထားသော aerosols များ ပျံ့နှံ့ခြင်းမှတစ်ဆင့် ညစ်ညမ်းမှုဖြစ်နိုင်ခြေကိုလည်း မိတ်ဆက်ပေးပါသည်။စမ်းသပ်မှုများပြုလုပ်သည့်အခါ၊ ဓာတ်ခွဲခန်းသုံးပစ္စည်းများနှင့် ခုံတန်းလျားနေရာများ ညစ်ညမ်းခြင်းမှ ရှောင်ရှားရန် အစီအမံများကို ဆောင်ရွက်နိုင်ပြီး၊ ထိုညစ်ညမ်းမှုသည် မှားယွင်းသောအပြုသဘော (သို့မဟုတ် မှားယွင်းသောအနုတ်လက္ခဏာ) ရလဒ်များကို ထုတ်ပေးနိုင်သောကြောင့်၊

ညစ်ညမ်းမှုဖြစ်နိုင်ခြေကို လျှော့ချရန်၊ Good Laboratory Practice ကို အချိန်တိုင်း ကျင့်သုံးသင့်သည်။အထူးသဖြင့် အောက်ပါအချက်များနှင့် ပတ်သက်၍ သတိထားသင့်သည် ။

1. ဓာတ်ပစ္စည်းများ ကိုင်တွယ်ခြင်း။
2. လုပ်ငန်းခွင်နှင့် စက်ကိရိယာများဖွဲ့စည်းခြင်း။
3. သတ်မှတ်ထားသော မော်လီကျူးနေရာအတွက် အသုံးပြုခြင်းနှင့် သန့်ရှင်းခြင်းဆိုင်ရာ အကြံပြုချက်
4. အထွေထွေ မော်လီကျူး ဇီဝဗေဒ အကြံပြုချက်
5. အတွင်းပိုင်းထိန်းချုပ်မှုများ
6. ကျမ်းကိုးစာရင်း

1. ဓာတ်ပစ္စည်းများ ကိုင်တွယ်ခြင်း။

aerosols မျိုးဆက်ကိုရှောင်ရှားရန်အတွက် မဖွင့်မီ centrifuge reagent ပြွန်များကို အတိုချုပ်လုပ်ပါ။အအေးခဲ-အမှင်များ နှင့် မာစတာစတော့များ ညစ်ညမ်းမှုကို ရှောင်ရှားရန် Aliquot ဓာတ်ပစ္စည်းများ။ဓါတ်ခွဲခန်းများနှင့် တုံ့ပြန်မှုပြွန်များအားလုံးကို ရှင်းလင်းစွာ အညွှန်းတပ်ပြီး ရက်စွဲတပ်ပြီး စမ်းသပ်မှုအားလုံးတွင် အသုံးပြုသည့် ဓါတ်ပစ္စည်းအများအပြားနှင့် အတွဲနံပါတ်များ၏ မှတ်တမ်းများကို ထိန်းသိမ်းပါ။စစ်ထုတ်ခြင်းဆိုင်ရာ အကြံပြုချက်များကို အသုံးပြု၍ ဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် နမူနာများအားလုံးကို Pipetteမဝယ်ယူမီ၊ filter အကြံပြုချက်များသည် အသုံးပြုမည့် pipette အမှတ်တံဆိပ်နှင့် ကိုက်ညီကြောင်း ထုတ်လုပ်သူထံ အတည်ပြုရန် အကြံပြုလိုပါသည်။

2. လုပ်ငန်းခွင်နှင့် စက်ကိရိယာများဖွဲ့စည်းခြင်း။

သန့်ရှင်းသောနေရာများ (Pre-PCR) မှ ညစ်ပတ်သောနေရာများ (Post-PCR) အထိ လမ်းကြောင်းတစ်ခုတွင် လည်ပတ်စီးဆင်းမှုရှိကြောင်း သေချာစေရန်အတွက် လုပ်ငန်းခွင်ကို စနစ်တကျစီစဉ်ထားသင့်သည်။အောက်ဖော်ပြပါ ယေဘူယျသတိထားချက်များသည် ညစ်ညမ်းမှုဖြစ်နိုင်ခြေကို လျှော့ချရန် ကူညီပေးပါလိမ့်မည်။သီးခြားသတ်မှတ်ထားသော အခန်းများ သို့မဟုတ် အနည်းဆုံး ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ သီးခြားနေရာများတွင် ရှိသည်၊ အတွက်- မာစတာရောစပ်ပြင်ဆင်မှု၊ နျူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူမှုနှင့် DNA ပုံစံပြားထပ်တိုးမှု၊ ချဲ့ထွင်ခြင်းနှင့် ချဲ့ထွင်ထားသော ထုတ်ကုန်များကို ကိုင်တွယ်ခြင်းနှင့် ထုတ်ကုန်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း၊ ဥပမာ- ဂျယ်အီလက်ထရိုဖိုရစစ်။

အချို့သောဆက်တင်များတွင် သီးခြားအခန်း 4 ခန်းရှိရန်ခက်ခဲသည်။ဖြစ်နိုင်သော်လည်း နှစ်လိုဖွယ်နည်းသော ရွေးချယ်မှုမှာ ကွန်တိန်နာဧရိယာတွင် မာစတာရောစပ်ပြင်ဆင်မှုကို ဥပမာ- laminar flow cabinet တွင် ပြုလုပ်ရန်ဖြစ်သည်။nested PCR ချဲ့ထွင်မှုကိစ္စတွင်၊ mastermix ပြင်ဆင်မှုအတွက် 'သန့်ရှင်း' ဧရိယာတွင် မာစတာရောစပ်ပြင်ဆင်ခြင်းကို ပြင်ဆင်သင့်သော်လည်း ပင်မ PCR ထုတ်ကုန်ဖြင့် inoculation ကို ချဲ့ထွင်သည့်အခန်းတွင် ပြုလုပ်သင့်ပြီး ဖြစ်နိုင်ပါက၊ သီးခြားကန့်သတ်ဧရိယာ (ဥပမာ- laminar စီးဆင်းမှု ကက်ဘိနက်)။

အခန်း/ဧရိယာတစ်ခုစီတွင် ရှင်းလင်းစွာတံဆိပ်တပ်ထားသော ပိုက်ပိုက်များ၊ စစ်ထုတ်ကိရိယာများ၊ ပြွန်စင်များ၊ ရေစက်များ၊ centrifuges (သက်ဆိုင်ပါက)၊ ဘောပင်များ၊ ယေဘုယျဓာတ်ခွဲခန်းသုံးပစ္စည်းများ၊ ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီများနှင့် ၎င်းတို့၏ သက်ဆိုင်ရာအလုပ်ရုံများတွင် ကျန်ရှိနေမည့် လက်အိတ်သေတ္တာများ သီးခြားစီ လိုအပ်ပါသည်။သတ်မှတ်ထားသောနေရာများကြားတွင် ရွေ့လျားသည့်အခါ လက်များကို ဆေးကြောပြီး လက်အိတ်များနှင့် ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီများကို ပြောင်းလဲပေးရပါမည်။ဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် ပစ္စည်းကိရိယာများကို ညစ်ပတ်သောနေရာမှ သန့်ရှင်းသောနေရာသို့ မရွှေ့သင့်ပါ။ဓါတ်ပစ္စည်း သို့မဟုတ် စက်ပစ္စည်းအစိတ်အပိုင်းများကို နောက်သို့ရွှေ့ရန် လိုအပ်သည့် ပြင်းထန်သောကိစ္စရပ်တစ်ခု ပေါ်ပေါက်ပါက၊ ၎င်းကို ပထမဦးစွာ ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက် 10% ဖြင့် ညစ်ညမ်းစေကာ ပိုးသတ်ထားသောရေဖြင့် သုတ်ပေးရပါမည်။

မှတ်ချက်

10% ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက် ပျော်ရည်ကို နေ့စဉ် လတ်လတ်ဆတ်ဆတ် ပြုလုပ်ရပါမည်။ညစ်ညမ်းခြင်းအတွက် အသုံးပြုသောအခါ၊ အနည်းဆုံး ထိတွေ့ချိန် ၁၀ မိနစ်ကို လိုက်နာသင့်သည်။
တစ်နည်းအားဖြင့်၊ ဒေသန္တရဘေးကင်းရေး အကြံပြုချက်များမှ ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက်ကို အသုံးပြုခြင်းအား ခွင့်မပြုပါက သို့မဟုတ် ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက်သည် စက်ကိရိယာ၏ သတ္တုအစိတ်အပိုင်းများကို ညစ်ညမ်းစေခြင်းအတွက် မသင့်လျော်ပါက DNA ဖျက်နိုင်သော မျက်နှာပြင် ညစ်ညမ်းစေသည့် ညစ်ညမ်းစေသော မျက်နှာပြင်များအဖြစ် တရားဝင်အသိအမှတ်ပြုထားသော စီးပွားဖြစ်ရရှိနိုင်သော ထုတ်ကုန်များကို အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။

အကောင်းဆုံးကတော့ ဝန်ထမ်းများသည် ညစ်ညမ်းသောနေရာများ (PCR လွန်) မှ သန့်ရှင်းသောနေရာများ (PCR မတိုင်မီ) သို့ ထိုနေ့တွင်ပင် မသွားကြဘဲ တစ်ဖက်သတ်လမ်းညွှန်ထားသော အလုပ်စီးဆင်းမှုကျင့်ဝတ်များကို လိုက်နာသင့်သည်။သို့သော် ယင်းကို ရှောင်လွှဲ၍မရသော အခါသမယများ ရှိနိုင်ပါသည်။ထိုသို့သော အခါသမယတွင် ဝန်ထမ်းများသည် လက်ကို သေချာစွာဆေးကြောရန်၊ လက်အိတ်များလဲလှယ်ရန်၊ သတ်မှတ်ထားသော ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီကို အသုံးပြုကာ ဓာတ်ခွဲခန်းစာအုပ်များကဲ့သို့သော အခန်းအပြင်မှ ထပ်မံယူလိုသည့် ကိရိယာများကို ထပ်မံမိတ်ဆက်ခြင်းမပြုရန် ဂရုစိုက်ရမည်ဖြစ်သည်။မော်လီကျူးနည်းလမ်းများဆိုင်ရာ ဝန်ထမ်းများကို လေ့ကျင့်သင်ကြားရာတွင် ထိုကဲ့သို့သော ထိန်းချုပ်မှုအစီအမံများကို အလေးထားသင့်သည်။

အသုံးပြုပြီးနောက်၊ ခုံတန်းလျားများကို 10% ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက် (အကြွင်းအကျန်အရောင်ချွတ်ဆေး) 70% အီသနော (သို့) တရားဝင်ရရှိထားသော စီးပွားရေးအရရရှိနိုင်သော DNA ဖျက်ပိုးမွှားများကို ဖယ်ရှားရန် မြုံသောရေဖြင့် သန့်စင်သင့်ပါသည်။အကောင်းဆုံးကတော့၊ ရောင်ခြည်ဖြာထွက်ခြင်းဖြင့် ညစ်ညမ်းမှုကင်းစင်စေရန်အတွက် ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည် (UV) မီးချောင်းများကို တပ်ဆင်သင့်သည်။သို့သော်၊ ဓာတ်ခွဲခန်းဝန်ထမ်းများ၏ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်ထိတွေ့မှုကိုကန့်သတ်ရန်အတွက်၊ ဥပမာ-ဘေးကင်းရေးပုံးများ၊ အလုံပိတ်အလုပ်နေရာများတွင် UV မီးချောင်းများအသုံးပြုခြင်းကို ကန့်သတ်သင့်သည်။မီးချောင်းများ ထိရောက်မှုရှိစေရန်အတွက် UV မီးချောင်းများကို ဂရုစိုက်ခြင်း၊ လေဝင်လေထွက်နှင့် သန့်ရှင်းရေးအတွက် ထုတ်လုပ်သူညွှန်ကြားချက်များကို လိုက်နာပါ။

ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက်အစား 70% အီသနောကို အသုံးပြုပါက ညစ်ညမ်းမှုကို ပြီးမြောက်ရန် ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်ဖြင့် ဓာတ်ရောင်ခြည်ပေးရန်လိုအပ်ပါသည်။
ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက် ဖြင့် ရေဝဲနှင့် စင်ထရစ်ကို မသန့်ရှင်းပါနှင့်။ယင်းအစား၊ 70% Ethanol ဖြင့် သုတ်ပြီး ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်နှင့် ထိတွေ့ပါ သို့မဟုတ် စီးပွားဖြစ် DNA ဖျက်ဆေး ညစ်ညမ်းစေသော ဆေးကို အသုံးပြုပါ။ယိုဖိတ်မှုများအတွက် နောက်ထပ် သန့်ရှင်းရေး အကြံဉာဏ်အတွက် ထုတ်လုပ်သူနှင့် စစ်ဆေးပါ။ထုတ်လုပ်သူ၏ ညွှန်ကြားချက်များက ခွင့်ပြုပါက၊ pipette များကို autoclave ဖြင့် ပုံမှန်ပိုးသတ်ပေးသင့်ပါသည်။အကယ်၍ pipettes များကို autoclaved မလုပ်နိုင်ပါက 10% sodium hypochlorite (ပြီးနောက် ပိုးမွှားရေဖြင့် သေချာသုတ်ပါ) သို့မဟုတ် စီးပွားဖြစ် DNA ဖျက်ဆေး ညစ်ညမ်းစေသော ပိုးသတ်ဆေးဖြင့် ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်နှင့် ထိတွေ့ပြီးနောက် လုံလောက်ပါသည်။

ရာခိုင်နှုန်းမြင့်မားသော ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက်ဖြင့် သန့်ရှင်းရေးကို ပုံမှန်ပြုလုပ်ပါက ပိုက်ဆက်ပလတ်စတစ်နှင့် သတ္တုများကို နောက်ဆုံးတွင် ပျက်စီးစေနိုင်သည်။ထုတ်လုပ်သူထံမှ အကြံပြုချက်များကို ဦးစွာစစ်ဆေးပါ။စက်ပစ္စည်းအားလုံးကို ထုတ်လုပ်သူ အကြံပြုထားသော အချိန်ဇယားအတိုင်း ပုံမှန်ချိန်ညှိရန် လိုအပ်ပါသည်။သတ်မှတ်ထားသော ပုဂ္ဂိုလ်သည် သတ်မှတ်ချိန်ညှိမှုအချိန်ဇယားကို လိုက်နာရန်၊ အသေးစိတ်မှတ်တမ်းများကို ထိန်းသိမ်းထားကြောင်းနှင့် ဝန်ဆောင်မှုတံဆိပ်များကို စက်ကိရိယာပေါ်တွင် ရှင်းလင်းစွာပြသထားကြောင်း သေချာစေရေးတာဝန်ယူရမည်ဖြစ်သည်။

3. သတ်မှတ်ထားသော မော်လီကျူးနေရာအတွက် အသုံးပြုခြင်းနှင့် သန့်ရှင်းခြင်းဆိုင်ရာ အကြံပြုချက်

Pre-PCR- Reagent aliquoting/mastermix ပြင်ဆင်မှု- ၎င်းသည် မော်လီကျူးစမ်းသပ်မှုများ ပြင်ဆင်မှုတွင် အသုံးပြုသည့် နေရာအားလုံး၏ အသန့်ရှင်းဆုံးဖြစ်သင့်ပြီး စံပြအားဖြင့် ခရမ်းလွန်အလင်းရောင် တပ်ဆင်ထားသော သတ်မှတ်ထားသော laminar flow ဗီဒိုဖြစ်သင့်သည်။နမူနာများ၊ ထုတ်ယူထားသော nucleic acid နှင့် amplified PCR ထုတ်ကုန်များကို ဤဧရိယာတွင် မကိုင်တွယ်ရပါ။ချဲ့ထွင်နိုင်သော ဓာတ်ပစ္စည်းများကို ရေခဲသေတ္တာ (သို့မဟုတ် ထုတ်လုပ်သူ အကြံပြုချက်များအရ) တူညီသော သတ်မှတ်ထားသော နေရာလွတ်တစ်ခုတွင်၊ အကောင်းဆုံးအားဖြင့် laminar စီးဆင်းမှုပုံး သို့မဟုတ် PCR ဧရိယာဘေးတွင် ထားရှိသင့်သည်။Pre-PCR ဧရိယာ သို့မဟုတ် laminar flow cabinet သို့ဝင်ရောက်သည့်အခါတိုင်း လက်အိတ်များကို ပြောင်းလဲသင့်သည်။

Pre-PCR ဧရိယာ သို့မဟုတ် laminar flow cabinet ကို အောက်ပါအတိုင်း အသုံးမပြုမီနှင့် အပြီးတွင် သန့်စင်သင့်သည်- အစိုးရအဖွဲ့အတွင်းရှိ အရာများအားလုံးကို ဥပမာ-ပိုက်တပ်များ၊ tip boxes, vortex, centrifuge, tube racks, pens, etc. 70% Ethanol သို့မဟုတ် a ဖြင့် သုတ်ပါ။ စီးပွားဖြစ် DNA-ဖျက်ဆေး ညစ်ညမ်းစေသော ညစ်ညမ်းမှုကို ခြောက်သွေ့စေရန် ခွင့်ပြုပါ။ပိတ်ထားသောနေရာတစ်ခုတွင်၊ ဥပမာ- laminar flow cabinet သည် hood ကို UV light ဖြင့် မိနစ် 30 ကြာဖွင့်ထားပါ။

မှတ်ချက်

ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်ကို ဓာတုပစ္စည်းများ မထုတ်ပါနှင့်။သန့်ရှင်းပြီးသည်နှင့် ၎င်းတို့ကို ကက်ဘိနက်ထဲသို့သာ ရွှေ့ပါ။Reverse transcription PCR ကို လုပ်ဆောင်ပါက၊ ထိတွေ့မှုပေါ်ရှိ RNases များကို ဖြိုခွဲသည့် ဖြေရှင်းချက်ဖြင့် မျက်နှာပြင်များနှင့် စက်ကိရိယာများကို ဖယ်ရှားရန်လည်း အထောက်အကူဖြစ်နိုင်သည်။၎င်းသည် RNA ၏အင်ဇိုင်းပြိုကွဲခြင်းမှ မှားယွင်းသောအနုတ်လက္ခဏာရလဒ်များကို ရှောင်ရှားရန် ကူညီပေးနိုင်ပါသည်။ညစ်ညမ်းမှုကင်းစင်ပြီးနောက်နှင့် mastermix ကိုမပြင်ဆင်မီ၊ လက်အိတ်များကိုနောက်တစ်ကြိမ်ပြောင်းသင့်သည်၊ ထို့နောက်အစိုးရအဖွဲ့သည်အသုံးပြုရန်အဆင်သင့်ဖြစ်သည်။

PCR ကြိုတင်- Nucleic acid ထုတ်ယူခြင်း/ ပုံစံခွက် ထပ်လောင်းခြင်း-

Nucleic acid ကို သီးခြား pipettes အစုံ၊ filter tips, tube racks, fresh gloves, lab coats နှင့် အခြားသော equipment များကို အသုံးပြု၍ သီးခြားသတ်မှတ်ထားသော ဧရိယာတွင် ထုတ်ယူပြီး ကိုင်တွယ်ရပါမည်။ mastermix tubes သို့မဟုတ် plates ။ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာထားသည့် ထုတ်ယူထားသော နျူကလိစ်အက်ဆစ်နမူနာများ၏ ညစ်ညမ်းမှုကို ရှောင်ရှားရန်၊ အပြုသဘောဆောင်သော ထိန်းချုပ်မှု သို့မဟုတ် စံနှုန်းများကို မကိုင်တွယ်မီ လက်အိတ်များကို ပြောင်းလဲရန်နှင့် သီးခြား pipettes အစုံကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။PCR ဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် ချဲ့ထွင်ထားသော ထုတ်ကုန်များကို ဤဧရိယာတွင် ပိုက်ထည့်ခြင်းမပြုရပါ။နမူနာများကို တူညီသောဧရိယာရှိ သတ်မှတ်ထားသော ရေခဲသေတ္တာ သို့မဟုတ် ရေခဲသေတ္တာများတွင် သိမ်းဆည်းထားသင့်သည်။နမူနာအလုပ်ခွင်ကို mastermix space ကဲ့သို့ပင် သန့်စင်သင့်သည်။

Post-PCR- ချဲ့ထွင်ခြင်းနှင့် ချဲ့ထွင်ထားသော ထုတ်ကုန်ကို ကိုင်တွယ်ခြင်း။

ဤသတ်မှတ်ထားသောနေရာသည် ချဲ့ထွင်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်များအတွက်ဖြစ်ပြီး၊ PCR အကြိုဧရိယာများနှင့် ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာအရ သီးခြားဖြစ်သင့်သည်။၎င်းတွင် အများအားဖြင့် သာမိုစက်ဘီးသမားများနှင့် အချိန်နှင့်တပြေးညီ ပလပ်ဖောင်းများပါရှိပြီး၊ အကောင်းဆုံးအားဖြင့် nested PCR ကိုလုပ်ဆောင်နေပါက အဝိုင်း 1 PCR ထုတ်ကုန်ကို ပတ်ပတ်လည် 2 တုံ့ပြန်မှုသို့ ထည့်ရန်အတွက် အကောင်းဆုံးသောအားဖြင့် အဝိုင်း 1 PCR ထုတ်ကုန်ကို ထည့်သွင်းရန်အတွက် အကောင်းဆုံးဖြစ်သင့်သည်။ညစ်ညမ်းမှုအန္တရာယ် မြင့်မားသောကြောင့် PCR ဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် ထုတ်ယူထားသော နျူကလိစ်အက်ဆစ်ကို ဤနေရာတွင် မကိုင်တွယ်ရပါ။ဤဧရိယာတွင် လက်အိတ်များ၊ ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီများ၊ ပန်းကန်ပြားနှင့် ပြွန်စင်များ၊ ပိုက်ပိုက်များ၊ ဇကာအကြံပြုချက်များ၊ ပုံးများနှင့် အခြားကိရိယာအစုံအလင်ရှိသင့်သည်။ပြွန်များကို မဖွင့်မီ ဗဟိုချက်ထားရပါမည်။နမူနာအလုပ်ခွင်ကို mastermix space ကဲ့သို့ပင် သန့်စင်သင့်သည်။

Post-PCR- ထုတ်ကုန်ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာချက်

ဤအခန်းသည် ထုတ်ကုန်ထောက်လှမ်းသည့်ကိရိယာများ၊ ဥပမာ- ဂျယ်အီလက်ထရောနစ်ကန်များ၊ ပါဝါထုပ်များ၊ UV transilluminator နှင့် gel စာရွက်စာတမ်းစနစ်အတွက်ဖြစ်သည်။ဤဧရိယာတွင် လက်အိတ်များ၊ ဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီများ၊ ပန်းကန်ပြားနှင့် ပြွန်စင်များ၊ ပိုက်ပိုက်များ၊ ဇကာအကြံပြုချက်များ၊ ပုံးများနှင့် အခြားကိရိယာအစုံအလင်ရှိသင့်သည်။တင်နေသော ဆိုးဆေး၊ မော်လီကျူး အမှတ်အသားနှင့် agarose gel နှင့် ကြားခံ အစိတ်အပိုင်းများ အပါအဝင် အခြားသော ဓာတ်ပစ္စည်းများကို ဤဧရိယာထဲသို့ ယူဆောင်လာနိုင်ခြင်း မရှိပါ။နမူနာအလုပ်ခွင်ကို mastermix space ကဲ့သို့ပင် သန့်စင်သင့်သည်။

အရေးကြီးသောမှတ်ချက်

အကောင်းဆုံးမှာ၊ PCR လွန်ခန်းများတွင် အလုပ်ပြီးသွားပါက ထိုနေ့တွင် ကြိုတင် PCR အခန်းများကို မထည့်သင့်ပါ။၎င်းသည် လုံးဝရှောင်လွှဲ၍မရပါက၊ လက်ကို ဦးစွာ သေချာစွာဆေးကြောပြီး သီးခြားဓာတ်ခွဲခန်းအင်္ကျီများကို အခန်းများတွင် ဝတ်ဆင်ထားကြောင်း သေချာပါစေ။ဓာတ်ခွဲခန်းစာအုပ်များနှင့် စာရွက်စာတန်းများကို PCR လွန်ခန်းများတွင် အသုံးပြုပါက ၎င်းတို့ကို PCR အကြိုအခန်းများအတွင်းသို့ ယူဆောင်သွားခြင်းမပြုရပါ။လိုအပ်ပါက၊ ပရိုတိုကော/နမူနာ ID များ စသည်တို့၏ ပွားနေသော ပရင့်ထုတ်မှုများကို ယူပါ။

4. အထွေထွေ မော်လီကျူး ဇီဝဗေဒ အကြံပြုချက်

စစ်ဆေးမှုတားဆီးခြင်းကို ရှောင်ရှားရန် အမှုန့်မပါသော လက်အိတ်များကို အသုံးပြုပါ။မှန်ကန်သော ပိုက်ပိုက်နည်းပညာသည် ညစ်ညမ်းမှုကို လျှော့ချရန် အရေးကြီးဆုံးဖြစ်သည်။မမှန်ကန်သောပိုက်ပိုက်ဖြင့် အရည်များကို ဖြန်းပေးသောအခါတွင် ပက်ကျဲကျဲဖြစ်နိုင်ပြီး aerosols များဖန်တီးပေးနိုင်သည်။မှန်ကန်သော pipetting အတွက် အလေ့အကျင့်ကောင်းများကို အောက်ပါလင့်ခ်များတွင် တွေ့နိုင်သည်- pipetting to Gilson guide, Anachem pipetting technique videos, Centrifuge tubes ကိုမဖွင့်မီ၊ နှင့် splashing မဖြစ်စေရန် ဂရုတစိုက်ဖွင့်ပါ။ညစ်ညမ်းမှုများ ဖြစ်ပေါ်လာခြင်းကို ရှောင်ရှားရန် အသုံးပြုပြီးသည်နှင့် ချက်ချင်း ပြွန်များကို ပိတ်ပါ။

တုံ့ပြန်မှုများစွာကို လုပ်ဆောင်သောအခါ၊ ဘုံဓာတ်ပစ္စည်းများ (ဥပမာ- ရေ၊ dNTPs၊ ကြားခံ၊ primers နှင့် အင်ဇိုင်း) ပါဝင်သော မာစတာရောစပ်တစ်ခုကို ပြင်ဆင်ပါ။ရေခဲ သို့မဟုတ် အအေးတုံးပေါ်တွင် မာစတာရောစပ်မှုကို ထည့်သွင်းရန် အကြံပြုထားသည်။Hot Start အင်ဇိုင်းကို အသုံးပြုခြင်းသည် သီးသန့်မဟုတ်သော ထုတ်ကုန်များ ထုတ်လုပ်မှုကို လျှော့ချရန် ကူညီပေးနိုင်ပါသည်။ပျက်စီးယိုယွင်းမှုကို ရှောင်ရှားရန်အတွက် အလင်းရောင်မှ ဖြာထွက်သည့် ပစ္စတင်များပါရှိသော ဓာတ်ပစ္စည်းများကို ကာကွယ်ပါ။

5. အတွင်းပိုင်းထိန်းချုပ်မှုများ

တုံ့ပြန်မှုများအားလုံးတွင် ပုံစံမပြသော ထိန်းချုပ်မှုနှင့်အတူ ကောင်းစွာလက္ခဏာရပ်ဖြင့် အတည်ပြုထားသော၊ အတည်ပြုထားသော အပြုသဘောနှင့် အနုတ်လက္ခဏာ ထိန်းချုပ်မှုများပါ၀င်သည်နှင့် အရေအတွက်ဆိုင်ရာတုံ့ပြန်မှုများအတွက် အချက်ပေါင်းများစွာ titrated trendline တစ်ခုပါဝင်သည်။အပြုသဘောဆောင်သောထိန်းချုပ်မှုသည် ညစ်ညမ်းမှုအန္တရာယ်ဖြစ်စေနိုင်လောက်အောင် ပြင်းထန်မှုမဖြစ်သင့်ပါ။nucleic acid ထုတ်ယူခြင်းကို လုပ်ဆောင်သောအခါ အပြုသဘောဆောင်သော နှင့် အနုတ်လက္ခဏာ ထုတ်ယူခြင်း ထိန်းချုပ်မှုများကို ထည့်သွင်းပါ။

အသုံးပြုသူများ၏ ကျင့်ဝတ်စည်းကမ်းများကို သိရှိနိုင်စေရန် နယ်ပယ်တစ်ခုစီတွင် ရှင်းလင်းသောညွှန်ကြားချက်များ ထုတ်ပြန်ရန် အကြံပြုအပ်ပါသည်။လက်တွေ့နမူနာများတွင် DNA သို့မဟုတ် RNA ပမာဏ အလွန်နည်းသော DNA သို့မဟုတ် RNA ပမာဏကို ထောက်လှမ်းနိုင်သော ဓာတ်ခွဲခန်းများသည် PCR မတိုင်မီအခန်းများတွင် အပြုသဘောဆောင်သောလေဖိအားအနည်းငယ်ရှိသည့် သီးခြားလေထုကိုင်တွယ်မှုစနစ်များထားရှိခြင်း၏ နောက်ထပ်လုံခြုံရေးအတိုင်းအတာကို ချမှတ်လိုပေမည်။

နောက်ဆုံးအနေဖြင့်၊ အရည်အသွေးအာမခံချက် (QA) အစီအစဉ်ကိုရေးဆွဲခြင်းသည် အထောက်အကူဖြစ်သည်။ထိုသို့သောအစီအစဥ်တွင် ဓါတ်ကူပစ္စည်းမာစတာစတော့များနှင့် လုပ်ငန်းစတော့များစာရင်းများ၊ အစုံလိုက်များနှင့် ဓာတ်ပစ္စည်းများသိုလှောင်ခြင်းဆိုင်ရာ စည်းမျဉ်းများ၊ ထိန်းချုပ်မှုရလဒ်များကို အစီရင်ခံခြင်း၊ ဝန်ထမ်းများလေ့ကျင့်ရေးအစီအစဉ်များ၊ ပြဿနာဖြေရှင်းခြင်းဆိုင်ရာ အယ်လဂိုရီသမ်များနှင့် လိုအပ်သည့်အခါ ပြန်လည်ကုစားခြင်းလုပ်ဆောင်ချက်များ ပါဝင်သင့်သည်။

6. ကျမ်းကိုးစာရင်း

Aslan A၊ Kinzelman J၊ Dreelin E၊ Anan'eva T၊ Lavander J. အခန်း 3- qPCR ဓာတ်ခွဲခန်းတစ်ခု တည်ဆောက်ခြင်း။USEPA qPCR နည်းလမ်း 1611 ကို အသုံးပြု၍ အပန်းဖြေရေများကို စမ်းသပ်ရန်အတွက် လမ်းညွှန်စာတမ်း။ Lansing- မစ်ရှီဂန်ပြည်နယ် တက္ကသိုလ်။

ပြည်သူ့ကျန်းမာရေး အင်္ဂလန်၊ NHS။အဏုဇီဝဗေဒ စုံစမ်းစစ်ဆေးမှုများအတွက် UK စံချိန်စံညွှန်းများ- မော်လီကျူး ချဲ့ထွင်စစ်ဆေးမှုများကို လုပ်ဆောင်သည့်အခါ ကောင်းမွန်သော ဓာတ်ခွဲခန်းအလေ့အကျင့်)။အရည်အသွေးလမ်းညွှန်။2013;4(4):1-15။

Mifflin T. PCR ဓာတ်ခွဲခန်းတစ်ခု တည်ဆောက်ခြင်း။Cold Spring Harb Protoc၂၀၀၇;၇။

Schroeder S 2013။ centrifuges များ၏ ပုံမှန်ထိန်းသိမ်းမှု- သန့်စင်ခြင်း၊ ထိန်းသိမ်းခြင်းနှင့် ပိုးသတ်ခြင်းများ၊ ရဟတ်များနှင့် အဒက်တာများ (အဖြူရောင် စာရွက် နံပါတ် 14)။ဟမ်းဘတ်- Eppendorf;၂၀၁၃။

Viana RV၊ Wallis CL။ရောဂါရှာဖွေရေးဓာတ်ခွဲခန်းများတွင်အသုံးပြုသော မော်လီကျူးအခြေခံစစ်ဆေးမှုများအတွက် Good Clinical Laboratory Practice (GCLP)၊ In: Akyar I, တည်းဖြတ်။ကျယ်ပြန့်သောအရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု။Rijeka၊ ခရိုအေးရှား- နည်းပညာ၊၂၀၁၁:၂၉–၅၂။