സാമ്പിളുകളിൽ കാണപ്പെടുന്ന ട്രെയ്സ് അളവുകളുടെ വർദ്ധനവ് വഴി വലിയ അളവിൽ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഉത്പാദിപ്പിക്കാനുള്ള കഴിവ് മോളിക്യുലാർ ഡിറ്റക്ഷൻ രീതികൾക്ക് ഉണ്ട്.സെൻസിറ്റീവ് ഡിറ്റക്ഷൻ പ്രവർത്തനക്ഷമമാക്കുന്നതിന് ഇത് പ്രയോജനകരമാണെങ്കിലും, ലബോറട്ടറി പരിതസ്ഥിതിയിൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ എയറോസോളുകളുടെ വ്യാപനത്തിലൂടെ മലിനീകരണ സാധ്യതയും ഇത് അവതരിപ്പിക്കുന്നു.പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തുമ്പോൾ, റിയാക്ടറുകൾ, ലബോറട്ടറി ഉപകരണങ്ങൾ, ബെഞ്ച് സ്പേസ് എന്നിവയുടെ മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കാൻ നടപടികൾ കൈക്കൊള്ളാം, കാരണം അത്തരം മലിനീകരണം തെറ്റായ പോസിറ്റീവ് (അല്ലെങ്കിൽ തെറ്റായ നെഗറ്റീവ്) ഫലങ്ങൾ സൃഷ്ടിച്ചേക്കാം.

മലിനീകരണ സാധ്യത കുറയ്ക്കുന്നതിന്, എല്ലാ സമയത്തും നല്ല ലബോറട്ടറി പ്രാക്ടീസ് നടത്തണം.പ്രത്യേകിച്ചും, ഇനിപ്പറയുന്ന പോയിന്റുകളിൽ മുൻകരുതലുകൾ എടുക്കണം:

1. റിയാക്ടറുകൾ കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നു
2. ജോലിസ്ഥലത്തിന്റെയും ഉപകരണങ്ങളുടെയും ഓർഗനൈസേഷൻ
3. നിയുക്ത മോളിക്യുലാർ സ്പേസിനായി ഉപയോഗിക്കാനും വൃത്തിയാക്കാനുമുള്ള ഉപദേശം
4. ജനറൽ മോളിക്യുലാർ ബയോളജി ഉപദേശം
5. ആന്തരിക നിയന്ത്രണങ്ങൾ
6. ഗ്രന്ഥസൂചിക

1. റിയാക്ടറുകൾ കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നു

എയറോസോളുകളുടെ ഉത്പാദനം ഒഴിവാക്കാൻ തുറക്കുന്നതിന് മുമ്പ് സംക്ഷിപ്തമായി സെൻട്രിഫ്യൂജ് റീജന്റ് ട്യൂബുകൾ.ഒന്നിലധികം ഫ്രീസ്-ഥോകളും മാസ്റ്റർ സ്റ്റോക്കുകളുടെ മലിനീകരണവും ഒഴിവാക്കാൻ അലിക്വോട്ട് റിയാജന്റുകൾ.എല്ലാ റിയാജന്റ്, റിയാക്ഷൻ ട്യൂബുകളും വ്യക്തമായി ലേബൽ ചെയ്യുകയും തീയതി നൽകുകയും എല്ലാ പരീക്ഷണങ്ങളിലും ഉപയോഗിക്കുന്ന റീജന്റ് ലോട്ടിന്റെയും ബാച്ച് നമ്പറുകളുടെയും ലോഗുകൾ പരിപാലിക്കുകയും ചെയ്യുക.ഫിൽട്ടർ നുറുങ്ങുകൾ ഉപയോഗിച്ച് എല്ലാ റിയാക്ടറുകളും സാമ്പിളുകളും പൈപ്പ് ചെയ്യുക.വാങ്ങുന്നതിന് മുമ്പ്, ഫിൽട്ടർ നുറുങ്ങുകൾ ഉപയോഗിക്കേണ്ട പൈപ്പറ്റിന്റെ ബ്രാൻഡിന് അനുയോജ്യമാണെന്ന് നിർമ്മാതാവുമായി സ്ഥിരീകരിക്കുന്നത് നല്ലതാണ്.

2. ജോലിസ്ഥലത്തിന്റെയും ഉപകരണങ്ങളുടെയും ഓർഗനൈസേഷൻ

വൃത്തിയുള്ള പ്രദേശങ്ങൾ (പ്രീ-പി‌സി‌ആർ) മുതൽ വൃത്തികെട്ട പ്രദേശങ്ങൾ വരെ (പോസ്റ്റ് പി‌സി‌ആർ) ജോലിയുടെ ഒഴുക്ക് ഒരു ദിശയിൽ നടക്കുന്നുണ്ടെന്ന് ഉറപ്പാക്കാൻ വർക്ക്‌സ്‌പേസ് സംഘടിപ്പിക്കണം.ഇനിപ്പറയുന്ന പൊതു മുൻകരുതലുകൾ മലിനീകരണ സാധ്യത കുറയ്ക്കാൻ സഹായിക്കും.മാസ്റ്റർമിക്സ് തയ്യാറാക്കൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്‌സ്‌ട്രാക്ഷൻ, ഡിഎൻഎ ടെംപ്ലേറ്റ് കൂട്ടിച്ചേർക്കൽ, ആംപ്ലിഫൈഡ് ഉൽപ്പന്നത്തിന്റെ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനും കൈകാര്യം ചെയ്യലും, ഉൽപ്പന്ന വിശകലനം, ഉദാ. ജെൽ ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസ് എന്നിവയ്‌ക്കായി പ്രത്യേക നിയുക്ത മുറികൾ, അല്ലെങ്കിൽ കുറഞ്ഞത് ശാരീരികമായി പ്രത്യേക മേഖലകൾ ഉണ്ടായിരിക്കുക.

ചില ക്രമീകരണങ്ങളിൽ, 4 പ്രത്യേക മുറികൾ ബുദ്ധിമുട്ടാണ്.ഒരു കണ്ടെയ്‌ൻമെന്റ് ഏരിയയിൽ മാസ്റ്റർമിക്‌സ് തയ്യാറാക്കൽ നടത്തുക എന്നതാണ് സാധ്യമായതും എന്നാൽ അഭികാമ്യമല്ലാത്തതുമായ ഓപ്ഷൻ, ഉദാഹരണത്തിന് ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റ്.നെസ്റ്റഡ് പി‌സി‌ആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷന്റെ കാര്യത്തിൽ, രണ്ടാം റൗണ്ട് പ്രതികരണത്തിനുള്ള മാസ്റ്റർമിക്‌സ് തയ്യാറാക്കുന്നത് മാസ്റ്റർമിക്‌സ് തയ്യാറാക്കുന്നതിനായി 'ക്ലീൻ' ഏരിയയിൽ തയ്യാറാക്കണം, പക്ഷേ പ്രാഥമിക പിസിആർ ഉൽപ്പന്നം ഉപയോഗിച്ച് കുത്തിവയ്പ്പ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ റൂമിൽ ചെയ്യണം, സാധ്യമെങ്കിൽ ഒരു പ്രത്യേക കണ്ടെയ്‌ൻമെന്റ് ഏരിയയിൽ (ഉദാ. ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റ്).

ഓരോ മുറിക്കും/ഏരിയയ്ക്കും വ്യക്തമായി ലേബൽ ചെയ്‌ത പൈപ്പറ്റുകൾ, ഫിൽട്ടർ നുറുങ്ങുകൾ, ട്യൂബ് റാക്കുകൾ, വോർടെക്‌സുകൾ, സെൻട്രിഫ്യൂജുകൾ (പ്രസക്തമാണെങ്കിൽ), പേനകൾ, ജനറിക് ലാബ് റിയാഗന്റുകൾ, ലാബ് കോട്ടുകൾ, കയ്യുറകളുടെ ബോക്‌സുകൾ എന്നിവ അതത് വർക്ക് സ്റ്റേഷനുകളിൽ അവശേഷിക്കുന്നു.നിയുക്ത പ്രദേശങ്ങൾക്കിടയിൽ നീങ്ങുമ്പോൾ കൈകൾ കഴുകുകയും കയ്യുറകളും ലാബ് കോട്ടുകളും മാറ്റുകയും വേണം.റിയാക്ടറുകളും ഉപകരണങ്ങളും വൃത്തിഹീനമായ സ്ഥലത്ത് നിന്ന് വൃത്തിയുള്ള സ്ഥലത്തേക്ക് മാറ്റരുത്.ഒരു റിയാജന്റോ ഉപകരണങ്ങളോ പിന്നിലേക്ക് നീക്കേണ്ടിവരുന്ന ഒരു അങ്ങേയറ്റത്തെ സാഹചര്യം ഉണ്ടായാൽ, അത് ആദ്യം 10% സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് അണുവിമുക്തമാക്കണം, തുടർന്ന് അണുവിമുക്തമായ വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് തുടയ്ക്കണം.

കുറിപ്പ്

10% സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ് ലായനി ദിവസവും പുതുതായി ഉണ്ടാക്കണം.അണുവിമുക്തമാക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, കുറഞ്ഞത് 10 മിനിറ്റ് സമ്പർക്ക സമയം പാലിക്കണം.
പകരമായി, പ്രാദേശിക സുരക്ഷാ ശുപാർശകൾ സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റിന്റെ ഉപയോഗം അനുവദിക്കുന്നില്ലെങ്കിലോ ഉപകരണങ്ങളുടെ ലോഹഭാഗങ്ങൾ അണുവിമുക്തമാക്കുന്നതിന് സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ് അനുയോജ്യമല്ലെങ്കിലോ ഡിഎൻഎ നശിപ്പിക്കുന്ന ഉപരിതല മലിനീകരണം എന്ന് സാധുതയുള്ള വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കാം.

മികച്ച രീതിയിൽ, ജീവനക്കാർ ഏകദിശയിലുള്ള വർക്ക് ഫ്ലോ ധാർമ്മികത പാലിക്കുകയും അതേ ദിവസം തന്നെ വൃത്തികെട്ട പ്രദേശങ്ങളിൽ നിന്ന് (PCR-ന് ശേഷമുള്ള) വൃത്തിയുള്ള പ്രദേശങ്ങളിലേക്ക് (പ്രീ-പിസിആർ) പോകാതിരിക്കുകയും വേണം.എന്നിരുന്നാലും, ഇത് ഒഴിവാക്കാനാവാത്ത സന്ദർഭങ്ങൾ ഉണ്ടാകാം.അത്തരം സന്ദർഭങ്ങൾ ഉണ്ടാകുമ്പോൾ, കൈകൾ നന്നായി കഴുകാനും കയ്യുറകൾ മാറ്റാനും നിയുക്ത ലാബ് കോട്ട് ഉപയോഗിക്കാനും ലാബ് ബുക്കുകൾ പോലെ മുറിയിൽ നിന്ന് വീണ്ടും എടുക്കാൻ ആഗ്രഹിക്കുന്ന ഉപകരണങ്ങളൊന്നും അവതരിപ്പിക്കാതിരിക്കാനും ഉദ്യോഗസ്ഥർ ശ്രദ്ധിക്കണം.തന്മാത്രാ രീതികളെക്കുറിച്ചുള്ള സ്റ്റാഫ് പരിശീലനത്തിൽ അത്തരം നിയന്ത്രണ നടപടികൾ ഊന്നിപ്പറയേണ്ടതാണ്.

ഉപയോഗത്തിന് ശേഷം, ബെഞ്ച് ഇടങ്ങൾ 10% സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ് (അണുവിമുക്തമായ ബ്ലീച്ച് നീക്കം ചെയ്യാൻ അണുവിമുക്തമായ വെള്ളം), 70% എത്തനോൾ അല്ലെങ്കിൽ സാധുതയുള്ള വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ ഡിഎൻഎ നശിപ്പിക്കുന്ന മലിനീകരണം എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് വൃത്തിയാക്കണം.വികിരണം വഴി മലിനീകരണം സാധ്യമാക്കുന്നതിന് അൾട്രാ വയലറ്റ് (UV) വിളക്കുകൾ ഘടിപ്പിച്ചിരിക്കണം.എന്നിരുന്നാലും, ലബോറട്ടറി ജീവനക്കാരുടെ അൾട്രാവയലറ്റ് എക്സ്പോഷർ പരിമിതപ്പെടുത്തുന്നതിന്, അൾട്രാവയലറ്റ് വിളക്കുകളുടെ ഉപയോഗം അടച്ച ജോലിസ്ഥലങ്ങളിൽ പരിമിതപ്പെടുത്തണം, ഉദാഹരണത്തിന് സുരക്ഷാ കാബിനറ്റുകൾ.വിളക്കുകൾ ഫലപ്രദമാണെന്ന് ഉറപ്പാക്കാൻ UV വിളക്കുകളുടെ സംരക്ഷണം, വെന്റിലേഷൻ, വൃത്തിയാക്കൽ എന്നിവയ്ക്കുള്ള നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിക്കുക.

സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റിന് പകരം 70% എത്തനോൾ ഉപയോഗിക്കുകയാണെങ്കിൽ, അണുവിമുക്തമാക്കൽ പൂർത്തിയാക്കാൻ അൾട്രാവയലറ്റ് വികിരണം ആവശ്യമാണ്.
സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് വോർട്ടക്സും സെന്റിഫ്യൂജും വൃത്തിയാക്കരുത്;പകരം, 70% എത്തനോൾ ഉപയോഗിച്ച് തുടച്ച് അൾട്രാവയലറ്റ് പ്രകാശം തുറന്നുകാട്ടുക, അല്ലെങ്കിൽ വാണിജ്യ ഡിഎൻഎ നശിപ്പിക്കുന്ന മലിനീകരണം ഉപയോഗിക്കുക.ചോർച്ചകൾക്കായി, കൂടുതൽ ക്ലീനിംഗ് ഉപദേശത്തിനായി നിർമ്മാതാവിനെ സമീപിക്കുക.നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുവദിക്കുകയാണെങ്കിൽ, ഓട്ടോക്ലേവ് ഉപയോഗിച്ച് പൈപ്പറ്റുകൾ പതിവായി അണുവിമുക്തമാക്കണം.പൈപ്പറ്റുകളെ ഓട്ടോക്ലേവ് ചെയ്യാൻ കഴിയുന്നില്ലെങ്കിൽ, 10% സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ് (അണുവിമുക്തമായ വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് നന്നായി തുടയ്ക്കുക) അല്ലെങ്കിൽ വാണിജ്യ ഡിഎൻഎ നശിപ്പിക്കുന്ന മലിനീകരണം, തുടർന്ന് യുവി എക്സ്പോഷർ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് വൃത്തിയാക്കിയാൽ മതിയാകും.

ഉയർന്ന ശതമാനം സോഡിയം ഹൈപ്പോക്ലോറൈറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് വൃത്തിയാക്കുന്നത് സ്ഥിരമായി ചെയ്താൽ പൈപ്പറ്റ് പ്ലാസ്റ്റിക്കുകളും ലോഹങ്ങളും നശിപ്പിക്കും;ആദ്യം നിർമ്മാതാവിൽ നിന്നുള്ള ശുപാർശകൾ പരിശോധിക്കുക.നിർമ്മാതാവ് നിർദ്ദേശിച്ച ഷെഡ്യൂൾ അനുസരിച്ച് എല്ലാ ഉപകരണങ്ങളും പതിവായി കാലിബ്രേറ്റ് ചെയ്യേണ്ടതുണ്ട്.കാലിബ്രേഷൻ ഷെഡ്യൂൾ പാലിക്കുന്നുണ്ടെന്നും വിശദമായ ലോഗുകൾ പരിപാലിക്കുന്നുവെന്നും സേവന ലേബലുകൾ ഉപകരണങ്ങളിൽ വ്യക്തമായി പ്രദർശിപ്പിക്കുന്നുവെന്നും ഉറപ്പാക്കാൻ ഒരു നിയുക്ത വ്യക്തി ചുമതലപ്പെടുത്തിയിരിക്കണം.

3. നിയുക്ത മോളിക്യുലാർ സ്പേസിനായി ഉപയോഗിക്കാനും വൃത്തിയാക്കാനുമുള്ള ഉപദേശം

പ്രീ-പിസിആർ: റീജന്റ് അലിക്വോട്ടിംഗ് / മാസ്റ്റർമിക്സ് തയ്യാറാക്കൽ: തന്മാത്രാ പരീക്ഷണങ്ങൾ തയ്യാറാക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന എല്ലാ ഇടങ്ങളിൽ വെച്ച് ഏറ്റവും വൃത്തിയുള്ളതും യുവി ലൈറ്റ് ഘടിപ്പിച്ച ഒരു നിയുക്ത ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റ് ആയിരിക്കണം ഇത്.സാമ്പിളുകൾ, വേർതിരിച്ചെടുത്ത ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ്, ആംപ്ലിഫൈഡ് PCR ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ എന്നിവ ഈ പ്രദേശത്ത് കൈകാര്യം ചെയ്യാൻ പാടില്ല.ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ റിയാഗന്റുകൾ ഒരു ഫ്രീസറിൽ (അല്ലെങ്കിൽ നിർമ്മാതാവിന്റെ ശുപാർശകൾ പ്രകാരം റഫ്രിജറേറ്റർ) അതേ നിയുക്ത സ്ഥലത്ത്, ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റിനോ പ്രീ-പിസിആർ ഏരിയയ്‌ക്കോ അടുത്തായി സൂക്ഷിക്കണം.പ്രീ-പിസിആർ ഏരിയയിലോ ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റിലോ പ്രവേശിക്കുമ്പോൾ ഓരോ തവണയും കയ്യുറകൾ മാറ്റണം.

ഉപയോഗത്തിന് മുമ്പും ശേഷവും പ്രീ-പിസിആർ ഏരിയ അല്ലെങ്കിൽ ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റ് ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ വൃത്തിയാക്കണം: കാബിനറ്റിലെ എല്ലാ ഇനങ്ങളും, ഉദാ: പൈപ്പറ്റുകൾ, ടിപ്പ് ബോക്സുകൾ, വോർട്ടക്സ്, സെൻട്രിഫ്യൂജ്, ട്യൂബ് റാക്കുകൾ, പേനകൾ മുതലായവ 70% എത്തനോൾ അല്ലെങ്കിൽ എ. വാണിജ്യ ഡിഎൻഎ നശിപ്പിക്കുന്ന മലിനീകരണം, ഉണങ്ങാൻ അനുവദിക്കുക.ഒരു അടച്ച വർക്കിംഗ് ഏരിയയുടെ കാര്യത്തിൽ, ഉദാ ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റ്, ഹുഡ് 30 മിനിറ്റ് UV ലൈറ്റിലേക്ക് തുറന്നിടുക.

കുറിപ്പ്

അൾട്രാവയലറ്റ് പ്രകാശത്തിലേക്ക് റിയാക്ടറുകളെ തുറന്നുകാട്ടരുത്;കാബിനറ്റ് വൃത്തിയാക്കിയ ശേഷം മാത്രമേ അവയിലേക്ക് മാറ്റൂ.റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ പിസിആർ നടത്തുകയാണെങ്കിൽ, കോൺടാക്റ്റിലെ RNases തകർക്കുന്ന ഒരു പരിഹാരം ഉപയോഗിച്ച് ഉപരിതലങ്ങളും ഉപകരണങ്ങളും തുടച്ചുനീക്കുന്നതും സഹായകമായേക്കാം.ആർഎൻഎയുടെ എൻസൈം ഡിഗ്രേഡേഷനിൽ നിന്നുള്ള തെറ്റായ-നെഗറ്റീവ് ഫലങ്ങൾ ഒഴിവാക്കാൻ ഇത് സഹായിച്ചേക്കാം.മലിനീകരണത്തിനു ശേഷം, മാസ്റ്റർമിക്സ് തയ്യാറാക്കുന്നതിനു മുമ്പ്, കയ്യുറകൾ ഒരിക്കൽ കൂടി മാറ്റണം, തുടർന്ന് കാബിനറ്റ് ഉപയോഗിക്കാൻ തയ്യാറാണ്.

പ്രീ-പിസിആർ: ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ/ടെംപ്ലേറ്റ് കൂട്ടിച്ചേർക്കൽ:

ഒരു പ്രത്യേക സെറ്റ് പൈപ്പറ്റുകൾ, ഫിൽട്ടർ ടിപ്പുകൾ, ട്യൂബ് റാക്കുകൾ, ഫ്രഷ് ഗ്ലൗസ്, ലാബ് കോട്ടുകൾ, മറ്റ് ഉപകരണങ്ങൾ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കുകയും കൈകാര്യം ചെയ്യുകയും വേണം. മാസ്റ്റർമിക്സ് ട്യൂബുകൾ അല്ലെങ്കിൽ പ്ലേറ്റുകൾ.വിശകലനം ചെയ്യപ്പെടുന്ന വേർതിരിച്ചെടുത്ത ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് സാമ്പിളുകളുടെ മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കാൻ, പോസിറ്റീവ് നിയന്ത്രണങ്ങളോ മാനദണ്ഡങ്ങളോ കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നതിന് മുമ്പ് കയ്യുറകൾ മാറ്റാനും പ്രത്യേക പിപ്പറ്റുകൾ ഉപയോഗിക്കാനും ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.പിസിആർ റിയാക്ടറുകളും ആംപ്ലിഫൈഡ് ഉൽപ്പന്നങ്ങളും ഈ പ്രദേശത്ത് പൈപ്പ് ചെയ്യരുത്.സാമ്പിളുകൾ അതേ പ്രദേശത്തെ നിയുക്ത ഫ്രിഡ്ജുകളിലോ ഫ്രീസറുകളിലോ സൂക്ഷിക്കണം.സാമ്പിൾ വർക്ക്‌സ്‌പെയ്‌സ് മാസ്റ്റർമിക്‌സ് സ്‌പെയ്‌സ് പോലെ തന്നെ വൃത്തിയാക്കണം.

പോസ്റ്റ്-പിസിആർ: ആംപ്ലിഫൈഡ് ഉൽപ്പന്നത്തിന്റെ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനും കൈകാര്യം ചെയ്യലും

ഈ നിയുക്ത ഇടം പോസ്റ്റ്-ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രക്രിയകൾക്കുള്ളതാണ്, അത് പ്രീ-പിസിആർ ഏരിയകളിൽ നിന്ന് ശാരീരികമായി വേറിട്ടുനിൽക്കണം.ഇതിൽ സാധാരണയായി തെർമോസൈക്ലറുകളും തത്സമയ പ്ലാറ്റ്‌ഫോമുകളും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, നെസ്റ്റഡ് PCR നടപ്പിലാക്കുകയാണെങ്കിൽ, റൗണ്ട് 1 PCR ഉൽപ്പന്നം റൗണ്ട് 2 റിയാക്ഷനിലേക്ക് ചേർക്കുന്നതിന് ഒരു ലാമിനാർ ഫ്ലോ കാബിനറ്റ് ഉണ്ടായിരിക്കണം.മലിനീകരണ സാധ്യത കൂടുതലായതിനാൽ പിസിആർ റിയാക്ടറുകളും വേർതിരിച്ചെടുത്ത ന്യൂക്ലിക് ആസിഡും ഈ പ്രദേശത്ത് കൈകാര്യം ചെയ്യാൻ പാടില്ല.ഈ പ്രദേശത്ത് പ്രത്യേകം കയ്യുറകൾ, ലാബ് കോട്ടുകൾ, പ്ലേറ്റ്, ട്യൂബ് റാക്കുകൾ, പൈപ്പറ്റുകൾ, ഫിൽട്ടർ ടിപ്പുകൾ, ബിന്നുകൾ, മറ്റ് ഉപകരണങ്ങൾ എന്നിവ ഉണ്ടായിരിക്കണം.തുറക്കുന്നതിന് മുമ്പ് ട്യൂബുകൾ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യണം.സാമ്പിൾ വർക്ക്‌സ്‌പെയ്‌സ് മാസ്റ്റർമിക്‌സ് സ്‌പെയ്‌സ് പോലെ തന്നെ വൃത്തിയാക്കണം.

പോസ്റ്റ്-പിസിആർ: ഉൽപ്പന്ന വിശകലനം

ഈ മുറി ഉൽപ്പന്നം കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഉപകരണങ്ങൾക്കുള്ളതാണ്, ഉദാ. ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ടാങ്കുകൾ, പവർ പാക്കുകൾ, യുവി ട്രാൻസിലുമിനേറ്റർ, ജെൽ ഡോക്യുമെന്റേഷൻ സിസ്റ്റം.ഈ ഭാഗത്ത് കയ്യുറകൾ, ലാബ് കോട്ടുകൾ, പ്ലേറ്റ്, ട്യൂബ് റാക്കുകൾ, പൈപ്പറ്റുകൾ, ഫിൽട്ടർ ടിപ്പുകൾ, ബിന്നുകൾ, മറ്റ് ഉപകരണങ്ങൾ എന്നിവയുടെ പ്രത്യേക സെറ്റ് ഉണ്ടായിരിക്കണം.ലോഡിംഗ് ഡൈ, മോളിക്യുലാർ മാർക്കർ, അഗറോസ് ജെൽ, ബഫർ ഘടകങ്ങൾ എന്നിവ ഒഴികെ മറ്റ് റിയാക്ടറുകളൊന്നും ഈ മേഖലയിലേക്ക് കൊണ്ടുവരാൻ കഴിയില്ല.സാമ്പിൾ വർക്ക്‌സ്‌പെയ്‌സ് മാസ്റ്റർമിക്‌സ് സ്‌പെയ്‌സ് പോലെ തന്നെ വൃത്തിയാക്കണം.

പ്രധാന കുറിപ്പ്

പിസിആറിന് ശേഷമുള്ള മുറികളിൽ ഇതിനകം ജോലി ചെയ്തിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, അതേ ദിവസം തന്നെ പ്രീ-പിസിആർ മുറികളിൽ പ്രവേശിക്കാൻ പാടില്ല.ഇത് പൂർണ്ണമായും ഒഴിവാക്കാനാവാത്തതാണെങ്കിൽ, ആദ്യം കൈകൾ നന്നായി കഴുകിയിട്ടുണ്ടെന്നും പ്രത്യേക ലാബ് കോട്ടുകൾ മുറികളിൽ ധരിച്ചിട്ടുണ്ടെന്നും ഉറപ്പാക്കുക.പിസിആർ കഴിഞ്ഞുള്ള മുറികളിൽ ലാബ് ബുക്കുകളും പേപ്പർ വർക്കുകളും പ്രീ-പിസിആർ റൂമുകളിൽ ഉപയോഗിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ അവ കൊണ്ടുപോകരുത്;ആവശ്യമെങ്കിൽ, പ്രോട്ടോക്കോളുകൾ/സാമ്പിൾ ഐഡികൾ മുതലായവയുടെ തനിപ്പകർപ്പ് പ്രിന്റ് ഔട്ട് എടുക്കുക.

4. ജനറൽ മോളിക്യുലാർ ബയോളജി ഉപദേശം

പരിശോധനാ തടസ്സം ഒഴിവാക്കാൻ പൊടി രഹിത കയ്യുറകൾ ഉപയോഗിക്കുക.ശരിയായ പൈപ്പറ്റിംഗ് സാങ്കേതികത മലിനീകരണം കുറയ്ക്കുന്നതിന് പരമപ്രധാനമാണ്.തെറ്റായ പൈപ്പറ്റിംഗ് ദ്രാവകങ്ങൾ വിതരണം ചെയ്യുമ്പോൾ തെറിച്ചു വീഴുന്നതിനും എയറോസോളുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നതിനും കാരണമാകും.ശരിയായ പൈപ്പറ്റിങ്ങിനുള്ള നല്ല പരിശീലനം ഇനിപ്പറയുന്ന ലിങ്കുകളിൽ കാണാം: ഗിൽസൺ ഗൈഡ് ടു പൈപ്പറ്റിംഗ്, അനാകെം പൈപ്പറ്റിംഗ് ടെക്നിക് വീഡിയോകൾ, സെന്ട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകൾ തുറക്കുന്നതിന് മുമ്പ്, തെറിക്കുന്നത് ഒഴിവാക്കാൻ അവ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം തുറക്കുക.മലിനീകരണത്തിന്റെ ആമുഖം ഒഴിവാക്കാൻ ഉപയോഗത്തിന് ശേഷം ഉടൻ ട്യൂബുകൾ അടയ്ക്കുക.

ഒന്നിലധികം പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾ നടത്തുമ്പോൾ, റീജന്റ് കൈമാറ്റങ്ങളുടെ എണ്ണം കുറയ്ക്കുന്നതിനും മലിനീകരണ ഭീഷണി കുറയ്ക്കുന്നതിനും പൊതുവായ റിയാഗന്റുകൾ (ഉദാഹരണത്തിന് വെള്ളം, ഡിഎൻടിപികൾ, ബഫർ, പ്രൈമറുകൾ, എൻസൈം) അടങ്ങിയ ഒരു മാസ്റ്റർമിക്സ് തയ്യാറാക്കുക.ഐസ് അല്ലെങ്കിൽ ഒരു തണുത്ത ബ്ലോക്കിൽ മാസ്റ്റർമിക്സ് സജ്ജീകരിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ഒരു ഹോട്ട് സ്റ്റാർട്ട് എൻസൈമിന്റെ ഉപയോഗം നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ഉത്പാദനം കുറയ്ക്കാൻ സഹായിച്ചേക്കാം.ഡീഗ്രേഡേഷൻ ഒഴിവാക്കാൻ ഫ്ലൂറസെന്റ് പ്രോബുകൾ അടങ്ങിയ റിയാക്ടറുകളെ പ്രകാശത്തിൽ നിന്ന് സംരക്ഷിക്കുക.

5. ആന്തരിക നിയന്ത്രണങ്ങൾ

എല്ലാ പ്രതികരണങ്ങളിലും ടെംപ്ലേറ്റ് ഇല്ലാത്ത നിയന്ത്രണവും ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പ്രതികരണങ്ങൾക്കായി മൾട്ടി-പോയിന്റ് ടൈട്രേറ്റഡ് ട്രെൻഡ്‌ലൈനും സഹിതം നല്ല സ്വഭാവമുള്ളതും സ്ഥിരീകരിച്ച പോസിറ്റീവ്, നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണങ്ങളും ഉൾപ്പെടുത്തുക.പോസിറ്റീവ് നിയന്ത്രണം അത്ര ശക്തമായിരിക്കരുത്, അത് മലിനീകരണ അപകടസാധ്യത സൃഷ്ടിക്കുന്നു.ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്‌സ്‌ട്രാക്ഷൻ നടത്തുമ്പോൾ പോസിറ്റീവ്, നെഗറ്റീവ് എക്‌സ്‌ട്രാക്ഷൻ നിയന്ത്രണങ്ങൾ ഉൾപ്പെടുത്തുക.

പെരുമാറ്റച്ചട്ടങ്ങളെക്കുറിച്ച് ഉപയോക്താക്കൾക്ക് ബോധവാന്മാരാകുന്നതിനായി ഓരോ മേഖലയിലും വ്യക്തമായ നിർദ്ദേശങ്ങൾ പോസ്റ്റുചെയ്യാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ക്ലിനിക്കൽ സാമ്പിളുകളിൽ ഡിഎൻഎയുടെയോ ആർഎൻഎയുടെയോ വളരെ കുറഞ്ഞ അളവുകൾ കണ്ടെത്തുന്ന ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് ലാബുകൾക്ക് പ്രീ-പിസിആർ മുറികളിൽ നേരിയ പോസിറ്റീവ് വായു മർദ്ദവും പിസിആർ ശേഷമുള്ള മുറികളിൽ അൽപ്പം പോസിറ്റീവ് വായു മർദ്ദവും ഉള്ള പ്രത്യേക എയർ ഹാൻഡ്ലിംഗ് സംവിധാനങ്ങൾ ഉള്ള അധിക സുരക്ഷാ മാനദണ്ഡം സ്വീകരിക്കാൻ താൽപ്പര്യപ്പെട്ടേക്കാം.

അവസാനമായി, ഒരു ഗുണനിലവാര ഉറപ്പ് (ക്യുഎ) പ്ലാൻ വികസിപ്പിക്കുന്നത് സഹായകരമാണ്.അത്തരം ഒരു പ്ലാനിൽ റീജന്റ് മാസ്റ്റർ സ്റ്റോക്കുകളുടെയും വർക്കിംഗ് സ്റ്റോക്കുകളുടെയും ലിസ്റ്റുകൾ, കിറ്റുകളും റിയാക്ടറുകളും സംഭരിക്കുന്നതിനുള്ള നിയമങ്ങൾ, നിയന്ത്രണ ഫലങ്ങളുടെ റിപ്പോർട്ടിംഗ്, സ്റ്റാഫ് പരിശീലന പരിപാടികൾ, ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗ് അൽഗോരിതങ്ങൾ, ആവശ്യമുള്ളപ്പോൾ പരിഹാര പ്രവർത്തനങ്ങൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുത്തണം.

6. ഗ്രന്ഥസൂചിക

അസ്ലാൻ എ, കിൻസൽമാൻ ജെ, ഡ്രെലിൻ ഇ, അനനേവ ടി, ലാവണ്ടർ ജെ. അധ്യായം 3: ഒരു qPCR ലബോറട്ടറി സജ്ജീകരിക്കുന്നു.USEPA qPCR രീതി 1611 ഉപയോഗിച്ച് വിനോദ ജലം പരിശോധിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശ രേഖ. ലാൻസിംഗ്- മിഷിഗൺ സ്റ്റേറ്റ് യൂണിവേഴ്സിറ്റി.

പബ്ലിക് ഹെൽത്ത് ഇംഗ്ലണ്ട്, NHS.മൈക്രോബയോളജി അന്വേഷണങ്ങൾക്കായുള്ള യുകെ മാനദണ്ഡങ്ങൾ: തന്മാത്രാ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പരിശോധനകൾ നടത്തുമ്പോൾ നല്ല ലബോറട്ടറി പ്രാക്ടീസ്).ഗുണനിലവാര മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശം.2013;4(4):1–15.

മിഫ്ലിൻ ടി. ഒരു പിസിആർ ലബോറട്ടറി സജ്ജീകരിക്കുന്നു.കോൾഡ് സ്പ്രിംഗ് ഹാർബ് പ്രോട്ടോക്ക്.2007;7.

ഷ്രോഡർ എസ് 2013. സെൻട്രിഫ്യൂജുകളുടെ പതിവ് അറ്റകുറ്റപ്പണികൾ: സെൻട്രിഫ്യൂജുകൾ, റോട്ടറുകൾ, അഡാപ്റ്ററുകൾ എന്നിവയുടെ വൃത്തിയാക്കൽ, പരിപാലനം, അണുവിമുക്തമാക്കൽ (വൈറ്റ് പേപ്പർ നമ്പർ 14).ഹാംബർഗ്: എപ്പൻഡോർഫ്;2013.

വിയാന ആർവി, വാലിസ് സിഎൽ.ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് ലബോറട്ടറികളിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന തന്മാത്രാ അധിഷ്ഠിത പരിശോധനകൾക്കുള്ള നല്ല ക്ലിനിക്കൽ ലബോറട്ടറി പ്രാക്ടീസ് (GCLP), ഇതിൽ: Akyar I, എഡിറ്റർ.ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണത്തിന്റെ വിശാലമായ സ്പെക്ട്ര.റിജേക്ക, ക്രൊയേഷ്യ: ഇൻടെക്;2011: 29–52.