Modi detectionis hypotheticae facultatem habent magnum volumen acidi nucleici producendi per amplificationem vestigii quantitatum in exemplis inventarum.Dum hoc utile est ad deprehensionem sensibilem efficiendam, etiam possibilitatem contaminationis introducit per dilatationem amplificationis aerosols in ambitu laboratorio.Cum experimenta faciendi, consilia suscipi possunt ad vitandam contagionem reagentium, armorum laboratorium et spatii scamni, qua talis contaminatio falsum-positivum (vel falsum-negativum) generare potest.

Ad auxilium reducere verisimilitudinem contaminationis, Praxis Laboratorium Bonum omni tempore exercendum est.Speciatim cavendae sunt circa sequentia:

1. Tractantem reagentia
2. Organization of workspace et apparatu
3. Usus et purgatio consilium ad designatum spatium hypotheticum
4. Generalis consilium biologiae hypotheticae
5. Internus controls
6. BIBLIOGRAPHY

1. Tractantem reagentia

Breviter centrifugium tubi gerentis ante foramen ad vitandam aerosolarum generationem.Aliquot reagentes ad vitandum multiplices dissolutiones et contagium nervum domini.Plane label et date omnes fistulae reagentes et reactiones ac trabes sortis gerentis et batch numerorum in omnibus experimentis adhibitis conservant.Pipette omnia reagentia et exempla utentes apicibus colum.Ante emptionem apta est fabrica cum fabrica quod apicibus colum ad notam fistulae adhibendam aptum est.

2. Organization of workspace et apparatu

Workspace ordinare debent ut cursus laboris in unam partem fiat, ab locis mundis (pre-PCR) ad sordida areas (post-PCR).Quae sequuntur cautiones generales ad casum contaminationis reducere adiuvabunt.Conclavia designata separatim habent, vel minimum locis corporaliter separatis, pro: mastermix praeparatio, acidi nuclei extractio et DNA template additionem, amplificationem et tractationem producti ampliati, et analysi producti, eg gel electrophoresis.

In quibusdam uncinis habentibus 4 singula conclavia difficilis est.Optio possibilis sed minus optabilis est facere praeparationem mastermix in area continenti, puta e laminae emissarium.In casu autem per amplificationem nested, praeparatio mastermix ad alterum rotundum reactionem praeparari debet in area "mundi" ad praeparationem mastermix, sed inoculatio cum primario PCR producto fieri debet in ampliatione conclavi, et, si fieri potest. in area dedicavit containment (eg fluxus laminae scrinium).

Quaelibet cella/area eget separato statuto clare intitulato tibiarum, apicibus sparguntur, tormentis tubi, vortexibus, machinis (si pertinet), calami, labrum genericum reagentium, lab tunicarum et pixides chirothecarum quae in propriis operibus manebunt.Manus lavari debent et chirothecae et lab tunicae mutatae, cum inter signata loca moveantur.Reagentia et apparatum ex sordida area ad mundum aream movere non debet.Si casus extremus oriatur, ubi gerens vel frustum instrumentorum retro moveri debet, prius decontaminari debet cum 10% sodio hypochlorite, deinde aqua sterili abstergenda.

Nota

Solutio hypochlori sodium 10% nova cotidie confici debet.Cum pro decontaminatione adhibeatur, minimum tempus contactus 10 minutorum adhaerendum est.
Vel, commercium productorum in promptu, qui decontaminantium superficiem DNA destruentes convalidantur, adhiberi possunt si commendatio localis salus non admittit usum sodii hypochloritis vel si sodium hypochlori ad decontaminationem partium metallicarum instrumentorum non est aptus.

Specimen, baculus manere debet ab opere unidirectionali ethos profluente et non ab areis sordidis (post-PCR) redire ad mundandas areas (pre-PCR) eodem die.Sed sit interdum nulla.Cum talis occasio oritur, curatores curare debent ut manus abluant, chirothecas mutent, designato lab tunica utantur et nullum apparatum introducere volent denuo e cubiculo, ut lab libri.Huiusmodi moderatio mensurae in baculo disciplinae de methodis hypotheticis inculcandae sunt.

Post usum, scamnum spatia cum 10% sodium hypochloritis purgari debent (secuta aqua sterili ad residua dealbata removenda), 70% ethanolum, vel validum commercium in promptu DNA destruendo decontaminantibus.Specimen lucernae ultra-violacae aptae sunt ad decontaminationem per irradiationem efficendam.Usus autem lampadum UV ad clausuras areas laborantium arcendus est, ut scrinia tuta, ad limitandam expositionem UV laboratorii baculi.Quaeso manere ab fabrica instructiones de cura lucerna UV, evacuatione et emundatione ut lampades efficaces maneant.

Si per 70% ethanolum loco sodii hypochlori, irradiatio cum UV luce opus erit ad decontaminationem perficiendam.
Vortice et centrifuge cum sodio hypochlorite noli mundare;potius, cum 70% ethanolo deleas et luci UV exponunt, vel commercii DNA destruentes decontaminantes utuntur.Pro pleno, reprehendo cum fabrica ad consilium purgandum ulterius.Si instructiones fabricare permittunt, fistulae ab autoclave petite sunt sterilis.Si pipettae autoclavari non possunt, satis est ut eos cum 10% sodio hypochlorite (ex aqua sterili penitus detergendo) abluant vel cum DNA commercii decontaminante destruente, sub UV nuditate.

Purgatio cum summus centesimae sodium hypochloritis tandem pipettam materiarum et metallorum, si opportuna basis fiat, laedere potest;prima commendatione fabrica reprehendo.Omni apparatu calibrari oportet regulariter iuxta fabricam-commendatam schedulam.Persona designatus praeesse debet ut schedula calibrationis adhaereat, acta accurata serventur, et titulus muneris in instrumento clare exponatur.

3. Usus et purgatio consilium ad designatum spatium hypotheticum

Prae-PCR: Praeparatio Reagens aliquoting / mastermix: haec omnium spatia mundissima esse debet ad experimentorum hypotheticarum praeparandarum et specimen laminae fluens arcae UV luce instructa.Exempla, acidum nucleicum extractum et auctum PCR productorum in hac provincia tractari non debent.Reagentes amplificatio in eodem spatio designato conservari debet in freezer (vel armario, ut per fabrica commendationes), specimen iuxta laminae fluxum scrinium seu area pre-PCR.Glovesti singulis diebus mutentur, intrans aream seu laminam pre-pcr aream vel scrinium defluentem.

Prae-PCR area seu laminae fluxus scrinii purgari debet ante et post usum sic: Absterge omnia supellex in cistula, puta pipettes, pixides apices, vortex, centrifugium, tortus tubi, calami, etc. cum 70% ethanolo vel a. mercatorum DNA destruentes decontaminant, et siccari permittunt.In area operativa clausa, eg casulae laminae, cucullo ad UV lumen pro 30 minutis expone.

Nota

Noli reagentia ad UV lucem exponere;ea sola in scrinium semel movenda pura est.Si transpositione PCR transpositionem faciendo, prodesse etiam potest cum solutione quae RNases in contactu frangit, superficies et apparatum deleri potest.Hoc adiuvare potest ad vitandos eventus falsi-negativos enzyme degradationis RNA.Post decontaminationem et antequam magistermix elaboraret, chirothecae denuo mutandae sunt, et tunc scrinium ad usum paratum est.

Pre-PCR: Acidum nucleicum extractionem/template additionem:

Acidum nucleicum extrahi et tractari debet in area secunda designata, utens separatim pipettarum, apices spargentium, tormentorum tubi, chirothecarum recentium, labrum tunicarum et aliorum instrumentorum. Haec regio etiam ad additionem templates, imperium et trendlines ad mastermix tube or plates.Ad contaminationem acidi nucleici extracti ad exempla quae resolvuntur, suadetur ut chirothecas mutet ante tractandas potestates vel signa positivas et utendi separatim piperis.PCR reagentes et producta amplificata in hac provincia non cani possunt.Exemplaria condi fridges vel freezers in eadem area designatis.Sample workspace purgari debet eodem modo ac spatium mastermix.

Post-PCR: amplificatio et tractatio producti ampliati

Hoc spatium designatum est ad processuum amplificationem et physice separatum a locis pre-PCR.Solet thermocycles continere et suggesta realia temporis, et specimen laminae fluere scrinium habere ad additionem rotundi 1 PCR producti ad rotundum 2 reactionem, si nidificatur PCR peragitur.PCR regentes et acidi nuclei extracti in hac provincia tractari non debent cum periculum contaminationis altum est.Haec regio singulas caestus, labrum tunicas, laminam et tormenta, fistulae, apices sparguntur, bins et alia instrumenta habere debet.Tubuli ante foramen oportet centrifugere.Sample workspace purgari debet eodem modo ac spatium mastermix.

Post-PCR: Product analysis

Hic locus est deprehensio instrumenti producti, eg gel electrophoresis lacus, sarcinarum potentia, UV transilluminator et ratio documentorum gel.Haec regio singula capita chirothecarum, labrum tunicarum, laminae et tubi tormenta, fistulae, apices sparguntur, bins et alia instrumenta habere debent.Nullae aliae reagentes in hanc aream adduci possunt, exclusis oneratione tinctura, hypothetica et gel agaroso, et quiddam quiddam.Sample workspace purgari debet eodem modo ac spatium mastermix.

Nota magna

Specimen cubicula prae-PCR eodem die ingredi non debent si opus iam peractum est in cubiculis post-PR.Quod si omnino necessarium est, ut manus prius abluatur, et ut certae tunicae lab in gazophylacio deferuntur.Lab libri et opuscula in prae-PCR conclavia sumi non debent, si in conclavia post-PER adhibita sunt;si opus est, duplicatas notas protocolla/sample IDs, etc.

4. Generalis consilium biologiae hypotheticae

Utere pulvere liberorum chirothecarum ad vitandum inhibitionis primordium.Recta pipetting ars praecipua est ad contaminationem reducendam.Recta pipetting provenire potest spargens in liquoribus dispensandis et aerosols creatione.Praxis recta ad recte pipetting usus inveniri potest in sequentibus nexus: Gilson dux ad pipetting, Anachem technicae artis fistulae, fistulae centrifugii ante aperitionem et eas diligenter aperi ad vitandum sonantes.Prope fistulae statim post usum contaminantium ad vitandam inductionem.

Cum multiplices reactiones faciendo, unum mastermix continens regentes communes (exempli gratia, aqua, dNTPs, quiddam, primers et enzyme) ad numerum translationum reagentiarum minuendum ac minas contaminationis minuendas.Commendatur in glacie vel frigido stipite constituere mastermix.Utere a Hot Satus enzyme adiuvari potest ad productionem fructuum non specialium reducere.Protege regentes in quibus rimamenta fluorescentes a lumine ad vitandum degradationem habent.

5. Internus controls

Includunt bene characterisas, confirmatas potestates positivas et negativas, una cum potestate non-temptata in omnibus reactionibus, et multi-punctum inclinatum titratum pro quantitatis reactionibus.Imperium positivum non tam validum esse debet ut contagione periculum inferat.Extractiones positivas et negativas includunt imperium cum extractione acidi nuclei faciendo.

Commendatur ut clarae instructiones in singulis locis mittantur ut utentes rationes agendi cognoscant.Diagnostic labs detegens humiles gradus DNA vel RNA in exemplis clinicis fortasse capere cupiat modum securitatis additionalis habendi separatos systemata aeris tractandi cum pressione aeris modice positivo in prae-PCR cubiculis et pressionis aeris leviter negativae in cubiculis post-PCR.

Postremo, qualitas certitudinis (QA) explicans utile consilium est.Tale consilium includere debet tabulas de nervum gerentis magistri et in nervo laborantes, regulas ad conponendas kits et reagentias, referentes eventus moderaminis, programmata institutionis baculi, algorithms sollicitudines, actiones remediales cum opus fuerit.

6. BIBLIOGRAPHY

Aslan A, Kinzelman J, Dreelin E, Anan'eva T, Lavander J. Chapter 3:Directio documenti ad probandas aquas recreationales usus USEPA qPCR methodus 1611. Universitas publica Lansing- Michigan.

Publicae Salutis Anglicanae, NHS.UK signa ad investigationes microbiologias: Bonum Laboratorium Practice cum amplificationem hypotheticam faciendo pertentat).Qualitas Ductu.2013; 4 (4): 1-15.

Mifflin T. PCR officinam erigens.Fons Frigidus Harb Protoc.2007;7.

Schroeder S 2013. Exercitatio machinarum conservatio: purgatio, conservatio et disinfectio machinarum, rotorum et adaptorum (charta alba No. 14).Hamburg: Eppendorf;MMXIII.

Viana RV, Wallis CL.Bonum Fusce Laboratorium Practice (GCLP) ad hypotheticas substructas probationes in diagnostica laboratorio adhibitas, In: Akyar I, editor.Lata spectra qualitatis.Rijeka, Croatia: Intech;2011: 29-52.